自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)细胞在人体的先天免疫系统中起着重要的作用,早在上个世纪70年代,科研人员就对它们进行了描述,但直到最近的15年,人们才逐渐了解NK细胞在帮助抗击癌症和其它疾病方面的复杂性和治疗潜力。
2000年,科学家研究证实小鼠癌症的发生和NK细胞自身的缺陷有关。2013年,有研究对癌症患者采用NK细胞疗法,在随后的跟访中,可以确定NK细胞的活性越好,癌症治疗效果会更好,同时也会降低癌症复发风险。这项研究无论是在胃癌、神经母细胞瘤还是结直肠癌患者群体中,都有相同的观察结果。同时在另外一项关于60例NK细胞疗法干预恶性肿瘤的临床疗效评价中,对比NK细胞回输治疗前及治疗后1周患者的生存质量,结果发现整体生存质量评分增加,各功能维度评分增加,症状维度评分减低。
而在最新的研究中,NK细胞疗法被广泛用于各种癌症的治疗,包括:血液系统肿瘤、神经母细胞瘤、卵巢肿瘤、横纹肌肉瘤、乳腺癌、胃癌等等,均取得了不错的临床治疗效果。大量研究数据表明,NK细胞疗法在提高恶性肿瘤患者免疫功能和生存质量方面都有极为不错的表现,可以与手术、放疗和化疗等传统治疗方案互补,在未来可能成为治疗癌症患者的新手段。
1.CAR-NK结合死亡受体(DR5)TRAIL变体治疗B细胞恶性肿瘤
2020年5月,致力于开发独特的递送平台的爱尔兰细胞工程技术公司Avectas获得了ONK公司的CAR-NK细胞疗法的独家许可,这款CAR-NK结合了ONK专有的死亡受体(DR5)TRAIL变体,用于治疗B细胞恶性肿瘤。
两家公司的合作目标是开发同种异体、现货型CAR-NK。旨在结合Avectas专有的非病毒细胞工程平台Solupore®与ONK的DR5 TRAIL变体技术,优化设计,提高特定癌细胞的靶向性,并启动短暂的次级癌细胞杀伤机制来增强治疗效果和剂量控制。
2020年4月2日,致力于开发同种异体细胞疗法的Celularity公司宣布,CYNK-001治疗成年COVID-19患者的IND获得了FDA批准,并准备开展I/II期临床研究,纳入了多达86名COVID-19患者。
CYNK-001是一种冷冻保存的、同种异体的、“现货”的NK细胞疗法,来源于胎盘造血干细胞。其被开发用于各种血液肿瘤和实体瘤的潜在治疗方案,目前正在急性髓细胞性白血病(AML),多发性骨髓瘤(MM)和多形性胶质母细胞瘤(GBM)患者中进行临床试验。
2020年7月,Dragonfly Therapeutics启动了DF6002针对晚期实体瘤的1/2期研究。该研究将对DF6002的安全性、耐受性、药代动力学生物学和临床活性展开研究,同时结合PD-1观察对局部晚期或转移性实体瘤患者的抑制作用,然后扩展所选适应症。
DF6002是一种单价IL-12免疫球蛋白Fc融合蛋白,能够通过建立生产性抗肿瘤反应所必需的炎性肿瘤微环境来实现强大的抗肿瘤功效。
8月18日,百时美施贵宝(BMS)宣布获得Dragonfly Therapeutics的IL-12研究性免疫疗法项目的独家授权,包括TriNKET免疫疗法候选药物——半衰期延长细胞因子DF6002。DF6002的授权是BMS从Dragonfly Therapeutics获得的第4个TriNKET免疫疗法候选药物的许可。
TriNKE(Tri-specific;NK cell Engagement Therapies/三特异性;自然杀伤细胞接合器疗法)平台的作用机制主要是通过提供癌细胞与免疫系统细胞(包括NK细胞本身、T细胞、B细胞和其他有助于攻击和杀死癌症的细胞)之间的主动连接进行运作,极大地提高了自然杀伤细胞—NK细胞的免疫能力。
12月1日,默沙东(MSD)从Dragonfly Therapeutics获得了首个TriNKET™免疫治疗候选药物的许可。
4.人类iPSC来源NK细胞治疗血液瘤和实体瘤
Fate Therapeutics是一家致力于开发NK细胞治疗用于癌症和免疫系统疾病细胞疗法的临床阶段生物公司,利用人类iPSC来开发NK细胞产品。这种“现成的”治疗方法,有望避免患者个性化治疗方法带来的限制。
FT516是一种工程化表达高亲和力不可裂解的CD16 (hnCD16)的现成NK细胞疗法,用于治疗急性髓系白血病和B细胞淋巴瘤;FT596的设计旨在克服CD19抗原逃逸,除了有靶向CD19的专有CAR以外,它还表达了一种新型的高亲和力、不可裂解的CD16 Fc受体,和白介素15受体融合蛋白(IL-15RF),这是一种有效的细胞因子复合物,无需系统性细胞因子支持,即可促进NK;F538是CRISPR编辑的、iPSC衍生的现货型NK细胞疗法,其被工程化设计了三种功能成分来增强先天免疫:新型高亲和力不可裂解的CD16 Fc受体、IL-15RF、CD38表达的消除。
1月13日,Fate Therapeutics宣布FDA批准FT516联合PDL1-、EGFR-和HER2-靶向的治疗性单抗用于晚期实体瘤的IND申请。这是F516的第2项IND申请(第1项用于治疗血液瘤),同时这也是该公司专利iPSC产品平台获得的第4个IND。
4月2日,Fate Therapeutics宣布完成FT596在B细胞淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病的临床研究的首例患者给药。2019年9月,美国FDA批准Fate公司FT596的IND申请。
5月20日,F538获美国FDA批准其IND申请,Ⅰ期临床将评估FT538作为单一疗法(多剂量)治疗AML,以及联合抗CD38单克隆抗体治疗多发性骨髓瘤。
5.K-NK通用型细胞疗法治疗肿瘤以及传染病
Kiadis Pharma是一家临床阶段的生物制药公司(股票代码:KDS),致力于开发创新的基于细胞的药物来治疗威胁生命的疾病。它与全国儿童医院的阿比盖尔·韦克斯纳研究所(AWRI)合作开发了Kiadis-NK细胞(K-NK细胞),作为COVID-19的暴露后抢先治疗疗法。
2020年9月14日,美国食品药品监督管理局(FDA)批准了AWRI的一项研究性新药(IND)申请,针对使用Kiadis专有的Universal Donor和PM21技术生产的现成的自然杀伤(NK)细胞用于成年人群的研究。
11月2日,赛诺菲宣布以3.08亿欧元(3.58亿美元)收购临床阶段生物制药公司Kiadis。此次收购将使赛诺菲获得了Kiadis的现货型NK细胞平台“K-NK”,开发用于治疗造血干细胞移植、液体和实体瘤以及传染病的NK细胞疗法。与CAR-NK细胞疗法相比,K-NK细胞疗法的优势是没有经过复杂的工程化改造,因此生产成本更低,可冻存备用,并可以与多种不同靶点的抗体药物联用。
1 月初,NantKwest公司在第38届JP Morgan医疗健康大会上,报告了其另一款候选疗法PD-L1.t-haNK联合N-803疗法在转移性胰腺癌的试验数据,在该实验中,前10名患者达到部分缓解,1名患者在接受PD-L1.t-haNK和N-803的5次输注之后,根据CT/Pet扫描患者的肿瘤转移已完全消退,并且已通过重复的CT/Pet扫描确认了完全缓解。
3月19日,NantKwest宣布了在二线和三线治疗默克尔细胞癌(MCC)的2期临床试验中(NCT03853317),首名MCC患者接受靶向CD16的haNK、辉瑞公司的PD-L1抑制剂avelumab、ImmunityBio的新型IL-15超级激动剂复合物N-803联合疗法。
PD-L1.t-haNK和haNK都是经过工程改造以表达高亲和力CD16受体的NK细胞,起源于NantKwest专有的NK-92(aNK)主细胞库。PD-L1.t-haNK还表达靶向PD-L1的CAR。两款NK通过直接结合先前与癌细胞结合的单克隆抗体,以介导的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)作用来增强对肿瘤细胞的杀伤作用。
2020年7月,致力于开发治疗癌症的工程化NK细胞疗法的临床阶段生物制药公司Nkarta Therapeutics登陆纳斯达克。其主要候选产品NKX101用于治疗复发/难治性急性髓系白血病(r/r AML)或高风险骨髓增生异常综合症(MDS)的IND申请也在当月获FDA批准。随着其IND计划的进行,Nkarta还将把NKX101扩展至实体肿瘤,他们将测试局部递送的方式在抑制肝脏相关局部转移中的效用。
NKX101的CAR被设计用来靶向NKG2D。与T细胞中编程的嵌合抗原受体不同的是,该靶点在肿瘤细胞上最多可找到的8种相关配体。与临床前模型中的非工程NK细胞相比,NKX101的NKG2D表达量增加了10倍,细胞毒活性增加了4倍。此外,Nkarta公司通过基因工程的方法,使外周血NK细胞表达膜结合的IL15(mbIL15),提高了NK细胞的存活、增殖和杀伤能力。
11月9日,Nkarta公司在2020年第35届癌症免疫治疗学会(SITC)年会上,以学术海报的形式公布了该公司另一个免疫疗法候选药物NKX019治疗B细胞淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病的最新临床前数据,结果支持了NKX019的效力、安全性和耐受性特征。另外,该公司预计将在2021年第1季度递交NKX019的IND申请。11月12日,Nkarta宣布,其主要候选产品NKX101用于r/r AML或高风险MDS的首次人体试验(first-in-human)已完成首例患者给药。
NK细胞的学术研究新进展
1.淋巴瘤新策略——双重功能化的NK细胞
12月7日,美国Scripps研究所的科学家在Angewandte Chemie杂志上发表了一篇Glycoengineering of NK Cells with Glycan Ligands of CD22 and Selectins for B‐Cell Lymphoma Therapy的论文,证明了一种治疗淋巴瘤有前景的新疗法。新方法使用天然的癌症靶向免疫细胞——自然杀伤(NK)细胞,经过修饰后可以选择性靶向淋巴瘤,在该研究中使小鼠淋巴瘤显著减少。
该研究使用化学酶糖酵解编辑策略重新工程化设计了NK-92MI细胞,将一种表面分子——高亲和力和特异性的CD22配体引入其中,使其能与B细胞表面受体CD22结合,以实现肿瘤特异性CD22靶向。
为了在体内有效杀伤淋巴瘤细胞,研究人员进一步使用一种新分子——E-选择素配体Sialyl Lewis X,对CD22配体修饰的NK-92MI细胞进行功能化,以促进其向淋巴瘤细胞之间的骨髓运输,结果显示,这种双重功能化的NK细胞显著延迟了小鼠淋巴瘤的进展。
这一研究结果表明,用CD22聚糖配体和选择素修饰的NK细胞分别促进了对B淋巴瘤细胞的靶向杀伤和改善了向癌细胞驻留部位的运输。
2.调控CAR-NK细胞免疫代谢优化扩增和细胞毒性
7月7日,Molecular Therapy Methods & Clinical Development 上刊登了一篇来自美国新泽西罗格斯大学刘东方研究团队的文章,其中提出通过调控CAR-NK细胞免疫代谢可以使得各种来源的NK和CAR-NK细胞获得优于传统方法的扩增和细胞毒性。研究证明了21-mIL21扩增系统优越性:
1. 221-mIL21细胞表面特定HLA表达图谱可以“批准”CAR-NK细胞杀伤活性
2. 221-mIL21细胞表面上调的共刺激分子可以增强的CAR-NK活性及增殖
3. EBV转化的221-mIL21细胞可以促进NK活化及增殖
4. 221-mIL21细胞可以通过增强代谢,从而促进记忆性CAR-NK形成
5. 221-mIL21细胞可以降低CAR-NK“自相残杀”
2020年11月19日,致力于恢复患者先天免疫的临床阶段德国生物技术公司Affimed在Blood杂志上公布其CD30/CD16A NK细胞engager(ICE)候选产品AFM13联合默沙东(MSD)的抗PD-1疗法Keytruda(帕博利珠单抗)治疗复发难治性霍奇金淋巴瘤的1b期临床研究最终结果,证明了该联合疗法具有良好的耐受性和疗效,最高治疗剂量下的客观缓解率(ORR)为88%,完全缓解率(CR)达到46%。
Affimed公司开发的ROCK(重定向优化细胞杀伤)技术平台能够快速发掘同时与NK/T细胞和肿瘤细胞表面抗原结合的多特异性抗体,抗体通过与NK/T细胞表面的特定抗原和肿瘤细胞表面抗原结合,成功的将NK/T细胞招募到肿瘤细胞附近,促进其杀伤作用。基于该技术平台,Affimed开创性的癌症免疫疗法是通过CD16A受体激发NK细胞的细胞毒性潜力的,目前其明星候选产品AFM13已经进入了临床II期开发。
总之,目前NK细胞临床试验大多数还处于比较早期的阶段,未来需要在现有技术的基础上,不断提高NK细胞治疗的有效性和安全性,优化生产(降低成本,缩短生产周期,优化工艺),扩大治疗范围。